第一節(jié) BSA的定義
牛血清白蛋白（BSA），又稱(chēng)第五組分，是牛血清中的一種白蛋白，包含583個(gè)氨基酸殘基，分子量為66.430 kDa，等電點(diǎn)為4.7。（可研報(bào)告）
第二節(jié) BSA的作用
1.BSA是酶的穩(wěn)定劑，防止酶的分解和非特異性吸附；
2.BSA能減輕有些酶的變性，能減輕有些不利環(huán)境因素如加熱，表面張力及化學(xué)因素引起的變性的至于作用機(jī)理我不是很清楚，可能是因?yàn)樗Y(jié)構(gòu)中有17個(gè)二硫鍵，和一個(gè)巰基，巰基的化學(xué)反應(yīng)很活潑，二硫鍵有抗氧化還原的作用，因此可與多種陽(yáng)離子，陰離子和小分子結(jié)合；
3.BSA能防止酶吸附到管壁而損失。
BSA一般做為穩(wěn)定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應(yīng)液中，因?yàn)橛行┟冈诘蜐舛认虏环€(wěn)定或活性低。加入BSA后，它可能起到“保護(hù)”或“載體”作用，不少酶類(lèi)添加 BSA后能使其活性大幅度提高。不需要加BSA的酶加入BSA一般不會(huì)受到什么影響。對(duì)多數(shù)底物DNA而言，BSA可以使酶切更完全，并可實(shí)現(xiàn)重復(fù)切割。在37℃，酶切反應(yīng)超過(guò)1h時(shí)，BSA可以使酶更加穩(wěn)定，因?yàn)樵诓缓珺SA的反應(yīng)緩沖液中，許多限制性?xún)?nèi)切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的時(shí)間。而B(niǎo)SA可以結(jié)合緩沖液或底物DNA中抑制限制性?xún)?nèi)切酶活性的金屬離子和其它化學(xué)物質(zhì)。
第三節(jié) BSA的制備方法
牛血清白蛋白Albumin from bovine serum,BSA，又稱(chēng)為 組分V，或Cohn V，名稱(chēng)起源于BSA最早的分餾法Cohn 冷乙醇法，Cohn法仍然是目前非常普遍的BSA分餾法，除了了冷乙醇法，目前最主要的還有熱休克法和色譜層析法。
一、Cohn 冷乙醇法
Cohn 冷乙醇法最早是由哈佛大學(xué)Edwin Cohn教授于1946年發(fā)明的，基于戰(zhàn)爭(zhēng)創(chuàng)傷治療對(duì)注射級(jí)別的蛋白的大規(guī)模需求，Cohn教授在較低的溫度下改變血漿的乙醇濃度和PH值，使其所含蛋白在不同的乙醇濃度下析出，在第五個(gè)析出的組分中主要成分即為BSA，所以BSA又稱(chēng)組分V或Cohn V。
Cohn 法是最早的BSA分餾法，為后續(xù)的BSA分餾提供了重要的思路，但是Cohn法過(guò)程中血漿蛋白涉及乙醇和低PH酸變性，以及多種雜蛋白干擾，所以分餾的BSA的質(zhì)量上差強(qiáng)人意，相比其他更先進(jìn)的分餾法，存在許多問(wèn)題：
BSA蛋白變性,片段化，活性低；
BSA純度較低，雜質(zhì)含量高；
BSA產(chǎn)量低；
適用一般實(shí)驗(yàn)，很難用于細(xì)胞培養(yǎng)。
二、熱休克法
Cohn 法為大規(guī)模生產(chǎn)BSA提供了思路，但是因?yàn)樯婕芭R床使用，生產(chǎn)的BSA需要進(jìn)行肝炎病毒滅活，血漿在9%乙醇和PH6.5的時(shí)候加熱至68度；熱休克法一般需要添加辛酸最大程度維持BSA不被變性。
熱休克法生產(chǎn)的BSA產(chǎn)量最高，純度也高，逐漸取代Cohn法成為BSA分餾主要方法，但是熱休克法BSA也有一些缺陷：
BSA蛋白高溫變性，活性低；
辛酸對(duì)細(xì)胞有損傷，不適合細(xì)胞培養(yǎng)；
純度低，加熱會(huì)產(chǎn)生很多變性BSA多聚體和一些片段化BSA，同時(shí)也會(huì)產(chǎn)生很多其他變性蛋白。
三、色譜層析法
色譜層析法Chromatographic法是目前BSA生產(chǎn)最為先進(jìn)的方法，也是最為溫和的方法；起于生產(chǎn)人血清白蛋白用于臨床治療，主要包括三個(gè)步驟，超濾，離子交換色譜層析和硫酸銨沉淀；整個(gè)過(guò)程，無(wú)加熱，無(wú)乙醇，無(wú)辛酸，最溫和的方法，最大程度保護(hù)BSA自然結(jié)構(gòu)和功能，生產(chǎn)的BSA結(jié)構(gòu)完整單體，絕不變性，活力最強(qiáng)，純度最高，無(wú)雜質(zhì)，最適合細(xì)胞培養(yǎng)，MP位于世界上最為純凈的血源地-新西蘭，生產(chǎn)BSA超過(guò)15年歷史，用于胚胎移植，大批量生產(chǎn)BSA。
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