第一節(jié) 產(chǎn)品生產(chǎn)技術(shù)發(fā)展現(xiàn)狀
目前，胸腺肽α１采用國際上先進(jìn)的合成方法——多肽固相合成法合成，經(jīng)液相色譜分離純化、精制而成。
1963年，美國著名生物化學(xué)家Brace Merrifield發(fā)明了多肽固相合成法。自此以后，多肽固相合成法被廣泛應(yīng)用于多肽和蛋白質(zhì)的 研究 領(lǐng)域，特別是短肽的合成，該方法經(jīng)過不斷地改進(jìn)和完善，已經(jīng)由原來的手工操作轉(zhuǎn)變?yōu)槿詣樱铣啥嚯牡姆N類也日益增多。氨基酸在進(jìn)入目的肽之前，氨基端需要保護(hù)基。根據(jù)保護(hù)基的不同，多肽固相合成方法可以分為兩大類：Boc方法和Fmoc方法。
1、Boc(,叔丁氧羰基)多肽固相合成法
Boc方法是經(jīng)典的多肽固相合成法，B Merrifleld在合成血管舒緩激肽時，就是應(yīng)用Boe作為a-氨基酸的保護(hù)基。經(jīng)過查閱大量的資料發(fā)現(xiàn)，現(xiàn)在Boc方法的使用率不高。雖然Boc方法正逐漸被Fmoc方法所替代，但是其本身的優(yōu)點還是不容忽視，有些方面值得我們借鑒和應(yīng)用。如澳大利亞科學(xué)家L Miranda等在利用“化學(xué)選擇連接”法合成蛋白質(zhì)時，選擇Boc方法合成組成蛋白質(zhì)的各個片段。與Fmoc方法相比，他們認(rèn)為Boc方法更干凈、更可靠，更能快速去除 一氨基保護(hù)基。Fmoec方法則過度依賴于肽序列，并且不能完全去除a-氨基的保護(hù)基。
2、Fmoc(9-芴甲氧羰基)多肽目相合成法
R B Merrifield曾報道，由于反應(yīng)的不完全，導(dǎo)致副反應(yīng)產(chǎn)物的積累，他期待固相多肽合成法的進(jìn)一步完善。不負(fù)他所望，經(jīng)過四十年的歷程，固相多肽合成法已經(jīng)得到了很大程度的改善。
Fmoc方法是Carpino和Hart在Boc方法的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種多肽固相合成的新方法，該方法使用的a-氨基的保護(hù)基是Fmoc。由于Fmoc對酸穩(wěn)定，易與堿作用，所以應(yīng)用堿性化合物作脫保護(hù)劑，具有反應(yīng)條件溫和、副反應(yīng)少、產(chǎn)率高等優(yōu)點。同時，F(xiàn)moc基團(tuán)有特征性紫外吸收，易于監(jiān)測控制反應(yīng)的進(jìn)行，因此，越來越受到人們的青睞。
第二節(jié) 產(chǎn)品生產(chǎn)工藝特點或流程
多肽固相合成法的臺成過程示意圖
第三節(jié) 國內(nèi)外生產(chǎn)技術(shù)發(fā)展趨勢 分析
1、技術(shù)趨勢
從動物胸腺組織中提取胸腺肽，其原料來源有限，純化步驟復(fù)雜，而且胸腺肽α１在提取的胸腺肽中含量極低，僅為0．56％～1．0％。目前臨床上所用的胸腺肽α１制劑均為化學(xué)合成制備，但是采用化學(xué)合成的方法成本較高，且合成的雜質(zhì)較多，不易純化，還會造成環(huán)境污染。采用基因工程菌發(fā)酵生產(chǎn)胸腺肽α１，有著多樣的設(shè)計及分離純化工藝，且各有優(yōu)缺點，大部分雖得到了成功表達(dá)，但由于表達(dá)量低，后處理工藝復(fù)雜，成本較高，收率低，也均未能真正實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化，但它仍是胸腺肽α１的主要發(fā)展趨勢。
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